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分子生物学 第四章 RNA转录ppt课件_图文

分子生物学 第 四章 RNA转录 教学 第4章 RNA转录 (RNA transcription) 4.1 基本概念 4.2 原核生物RNA转录启动子 4.3 真核生物RNA转录启动子 4.4 Transcription Elongation 4.5 Transcription termination 4.6 Anti-termination in Rho-dependent terminator of Prokaryotes 4.7 Pre-RNA processing in Eukaryotes 4.1 基本概念 ● 基因表达的第一步 ● 以D. S. DNA中的一条单链作为转录的模板 ● 在依赖DNA的RNA聚合酶的作用下 U,C G 配对的原则,合成RNA分子 ● 按A ● 模板单链 DNA的极性方向为3’ → 5’, 而非模板单链 DNA的极性方向与RNA链相同,均为5’ → 3’. (书写DNA序列时,仅写非模板序列,可不注明极性方向) DNA RNA 5’---ATGAGTA----3’ Non-template (sense strand) 3’---TACTCAT----5’ template (antisense strand) 5’----AUGAGUA----3’ ● 某一基因只以一条单链DNA 为模板进行转录(不对称转录) ● RNA的转录包括promotion, elongation, termination 三步骤 ● 从启动子(promoter)到终止子(terminator)称为 转录单位 (transcriptional unit) ● 原核生物中的转录单位多为 polycistron in operon 真核生物中的转录单位多为monocistron, No operon ● 转录原点记为+1,其上游记为负值,下游记为正值 -10 upstream +1 start point +10 downstream Discovery of messenger RNA 1955 Brachet synthesis of protein depend on the RNA 1955 Goldstein & Plaut RNA synthesized in nucleus and protein synthesized in cytoplasm 1956. Elliot Volkin & Lawrence Astrachan T2 phage E. coli Host RNA stopped T2 RNA starting Brenner, Jacob & Meselson (1961) T2 phage N15C13 Heavy ribosome in E. coli Shift to N14C12 label RNA with P32 or protein with S35 after incubation and break up E. coli add N14C12 ribosome as Ck density gradient results S 35 T2 protein bottom P32 T2 RNA bottom top top Brenner, Jacob & Meselson (1961) + N15C13 N15C13 + N14C12 ribosome as CK T2侵染E. coli后 核糖体上负载的RNA的碱基比与T2相似,而与E. coli相差甚远 E. coli 停止合成RNA & protein T2利用寄主细胞的转录元件和核糖体合成RNA & protein 核糖体上负载的RNA 是以T2DNA为模板转录的(其碱基组成反映了DNA的核苷酸序列) 足以携带一个基因的遗传信息,指导T2蛋白质的合成 至少暂时连接在核糖体上 核糖体无特异性 Brenner, Jacob & Meselson (1961) Jacob. Monod nonspecialized ribosomes that translate unstable RNAs called messengers (messenger RNA, mRNA) messengers are independent RNAs bring genetic information from the genes to ribosomes The music (polypeptide) depends on the tape (mRNA), not the player (ribosome) 4.2 RNA Transcription promotion in prokaryotes 4.2.1 Promoter 的结构与功能 ( Prok. E. coli ) a) promoter 由两个重要部分组成 ● -70 ~ -40 CAP—cAMP binding site 基因表达调控的正控制位点 CAP: cAMP Acceptor Protein (环化AMP受体蛋白) ● -35 ~ -10 RNApol. binding site Promoter region identified by DNAase method RNA polymerase (no NTP) DNase digestion DNA dissolve + DNA sequencing Promoter region including Sextama Box ; -35 site RNApol. loosely binding site RNApol. recognition site (R site) TTGAC (Sextama Box) Pribnow Box ; Initiation site

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